普通PCR MIX(2×Taq Advanced PCR Master Mix)

货号:A102-5
规格:250rxn/40μl;500rxn/20μl(1.0 ml×5支)
保存:-20℃避光保存两年
【产品概述】
本产品主要成份是通过基因工程技术改造的DNA聚合酶,核心组分包含Taq酶、dNTPs、Mg2+、PCR反应缓冲液和PCR反应稳定剂等,可以有效抑制非特异性扩增,显著提高扩增效率,从而对靶基因进行快速和准确扩增。本产品为2×预混试剂,使用时只需加入模板、引物和水,使其工作浓度为1×,即可进行反应。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。-20℃保存时,有时会形成沉淀,溶解后混匀不会影响使用效果。
【适用范围】
适用于常规PCR快速扩增检测(可以直接用菌液做模板进行PCR反应),PCR产物3’末端突出一个碱基A,纯化后的PCR产物可用于T/A克隆。建议扩增产物片段长度≤4kb。
【推荐qPCR体系(以40 μl反应体系为例)】

Component Volume Final  Concentration
2×Taq Advanced PCR Master Mix 20 μl
10 μM Forward Primer 1 μl 0.25 μM
10 μM Reverse Primer 1 μl 0.25 μM
PCR-grade Water Variable
Template Variable As Required
Total Volume 40 μl

可根据以下原则进行调整反应体系:反应体系中引物终浓度为0.25μM即可得到较好的扩增效果。当反应性能较差时,引物终浓度可以在0.1-0.5 μM范围内进行调整。PCR灵敏度极高,推荐将模板稀释后加入反应体系中,如模板为未稀释质粒原液,使用体积不应超过qPCR反应总体积的1/20。
【PCR反应条件】

Step Temperature Duration Cycles
Enzyme activation 94℃ 3 min 1
Initial Denaturation 94℃ 3 min 1
Denaturation 94℃ 30 sec 40
Annealing 50℃ 40 sec
Extension 72℃ 40 sec/kb
Extension 72℃ 5 min 1

结果检测:PCR反应结束后,取5μl反应产物,直接上样进行琼脂糖凝胶电泳。
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的合格产品。 在所有情况下,本公司对此产品所承担的责任,仅限于此产品的价值本身。

发表评论

您的电子邮箱地址不会被公开。