腺相关病毒(Adeno-Associated Viral Vector,AAV)属于微小病毒科( parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV的基因组约4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由145核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。由于腺相关病毒具有宿主范围广、安全性高、免疫原性低、表达稳定和物理性质稳定等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺相关病毒载体已成为世界上最常用的基因治疗载体之一。
AAV特点:
1 安全性高:迄今从未发现野生型AAV 对人体致病,重组 AAV 基因组序列上去除了大部分的野生型 AAV 基因组元件,进一步保证了安全性;
2 免疫原性低:AAV2的基因组仅 4681 个核苷酸,便于用常规的重组 DNA技术进行操作,而且进行动物实验时造成的免疫反应小;
3 宿主范围广:能感染分裂细胞和非分裂细胞;
4 表达稳定:能介导基因的长期稳定表达;
5 物理性质稳定:在60℃不能被灭活,能抗氯仿;
AAV载体不同血清型
研究发现 AAV 具有多种血清型,各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同,因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前爱科博生物在包装腺相关病毒时有9种不同的 AAV 血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒,见下表。
不同血清型AAV对各组织器官细胞的亲和性
感染部位 | 推荐血清型 | 注射方式 |
心脏 | AAV9 | 原位多点-局部/尾静脉-系统性 |
肝脏 | AAV8/AAV9 | 尾静脉注射 |
全脑(跨血脑屏障) | AAV9/AAV5 | 尾静脉注射 |
大脑(局部) | AAV9/AAV2/AAV5 | 立体定位注射 |
脊髓 | AAV5/AAV1/AAV9 | 鞘内注射 |
脂肪 | AAV9 | 腹内脂肪-腹腔/皮下脂肪-原位 |
骨骼肌 | AAV9 | 原位多点注射 |
眼睛 | AAV2 | 玻璃体腔注射 |
眼睛 | AAV-DJ | 视网膜下腔注射 |
肺脏 | AAV5 | 尾静脉注射 |
肺脏 | AAV6 | 无创肺部注射/滴鼻 |
肾脏 | AAV2/AAV9 | 肾脏肾盂原位注射/尾静脉注射 |
肠道 | AAV1/AAV5 | 灌肠/腹腔注射 |
血管(内皮为主) | AAV1/AAV5 | 腹主动脉局部感染 |
胰腺 | AAV8 | 腹腔注射/尾静脉注射 |
腺相关病毒产品及服务:
编号 | 调控方式 | 载体名称 | 滴度 | 荧光标记 | 启动子 |
AAV-01 | 过表达 | pAAV-MCS | 1012PFU/ml | 无 | CMV |
AAV-02 | 过表达 | pAAV-IRES-hrGFP | 1012PFU/ml | hrGFP | CMV |
AAV-03 | 干扰 | pAAV-ZsGreen-miRNA | 1012PFU/ml | ZsGreen | U6 |
AAV-04 | 干扰 | pAAV-ZsGreen-shRNA | 1012PFU/ml | ZsGreen | U6 |
重组腺相关病毒包装案例