重组腺相关病毒包装

腺相关病毒(Adeno-Associated Viral Vector,AAV)属于微小病毒科( parvovirus),为无包膜的单链线状 DNA 病毒。AAV的基因组约4700bp,包括上下游两个开放读码框架(ORF),位于分别由145核苷酸组成的2个反向末端重复序列(ITR)之间。由于腺相关病毒具有宿主范围广、安全性高、免疫原性低、表达稳定和物理性质稳定等优点,已被广泛地应用于基础研究和临床试验中,并且腺相关病毒载体已成为世界上最常用的基因治疗载体之一。

AAV特点:
1 安全性高:迄今从未发现野生型AAV 对人体致病,重组 AAV 基因组序列上去除了大部分的野生型 AAV 基因组元件,进一步保证了安全性;
2 免疫原性低:AAV2的基因组仅 4681 个核苷酸,便于用常规的重组 DNA技术进行操作,而且进行动物实验时造成的免疫反应小;
3 宿主范围广:能感染分裂细胞和非分裂细胞;
4 表达稳定:能介导基因的长期稳定表达;
5 物理性质稳定:在60℃不能被灭活,能抗氯仿;

AAV载体不同血清型

研究发现 AAV 具有多种血清型,各种不同血清型的 AAV 载体的主要区别是衣壳蛋白不同,因此对不同的组织和细胞的转染效率存在差异。目前爱科博生物在包装腺相关病毒时有9种不同的 AAV 血清型可供客户选择,建议客户针对不同组织器官选择相应血清型的 AAV 病毒,见下表。

不同血清型AAV对各组织器官细胞的亲和性

感染部位 推荐血清型 注射方式
心脏 AAV9 原位多点-局部/尾静脉-系统性
肝脏 AAV8/AAV9 尾静脉注射
全脑(跨血脑屏障) AAV9/AAV5 尾静脉注射
大脑(局部) AAV9/AAV2/AAV5 立体定位注射
脊髓 AAV5/AAV1/AAV9 鞘内注射
脂肪 AAV9 腹内脂肪-腹腔/皮下脂肪-原位
骨骼肌 AAV9 原位多点注射
眼睛 AAV2 玻璃体腔注射
眼睛 AAV-DJ 视网膜下腔注射
肺脏 AAV5 尾静脉注射
肺脏 AAV6 无创肺部注射/滴鼻
肾脏 AAV2/AAV9 肾脏肾盂原位注射/尾静脉注射
肠道 AAV1/AAV5 灌肠/腹腔注射
血管(内皮为主) AAV1/AAV5 腹主动脉局部感染
胰腺 AAV8 腹腔注射/尾静脉注射

腺相关病毒产品及服务:

编号 调控方式 载体名称 滴度 荧光标记 启动子
AAV-01 过表达 pAAV-MCS 1012PFU/ml CMV
AAV-02 过表达 pAAV-IRES-hrGFP 1012PFU/ml hrGFP CMV
AAV-03 干扰 pAAV-ZsGreen-miRNA 1012PFU/ml ZsGreen U6
AAV-04 干扰 pAAV-ZsGreen-shRNA 1012PFU/ml ZsGreen U6

重组腺相关病毒包装案例

 

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