重组腺病毒(AdV)是一种复制缺陷的腺病毒载体系统,在基因治疗、基础生命科学研究等领域被广泛应用。目前常用的腺病毒载体基于人腺病毒5型(Ad5),其基因组是36 kb长的线性双链DNA。腺病毒可通过自身的纤维(fiber)和细胞表面的受体结合被内吞进入细胞,然后从内吞体(endosome)转移到细胞质和细胞核内,借助细胞的转录和翻译机器启动病毒的复制组装。一个完整的病毒生活周期会引发细胞死亡从而释放出病毒粒子。
感染范围广
腺病毒可感染一系列哺乳动物细胞,除可感染几乎所有人的细胞类型外,还可感染包括大鼠、小鼠、兔、猪、羊、猴、鸡等物种。
感染效率高
因腺病毒的感染不依赖细胞周期,可感染悬浮细胞、原代细胞等。腺病毒具有嗜上皮细胞特性,因大多数肿瘤细胞均属于上皮细胞,这使得腺病毒非常适合应用于基因治疗领域。
载体容量大
腺病毒的载体容量较大,最高可达8kb。
腺病毒滴度检测
滴度检测方法:定量PCR检测病毒基因组中外源DNA拷贝数。
滴度检测原理:腺相关病毒的基因组为单链DNA,外源DNA拷贝数代表病毒基因组拷贝数。
病毒滴度高
腺病毒的滴度可高达1011PFU/ml,可用于动物水平的实验。
较好的生物安全性
腺病毒携带的基因不会整合到宿主细胞基因组中,实验中虽然会有一定机率出现RCA(即复制型腺病毒),但由于大多数成人体内都有针对腺病毒的抗体,所以一般危害不大。
腺病毒载体优势
① 表达快,腺病毒感染细胞后,1-2天即可表达
② 载体容量大,感染效率高,常用于感染难感染的细胞
③ 不整合到染色体中,无插入致突变性
④ 具有嗜肝性,易于感染肝细胞,腺病毒的体内应用是用于感染肝脏
不过由于腺病毒免疫原性高,对某些对外源刺激敏感的动物模型和组织中易造成炎症,体内应用需谨慎。
腺病毒产品与服务
| 编号 | 调控方式 | 载体名称 | 滴度 | 荧光标记 | 启动子 |
| ADV-01 | 过表达 | pDC316 | 1010PFU/ml | 无 | mCMV |
| ADV-02 | 过表达 | pDC316-mCMV-EGFP | 1010PFU/ml | EGFP | mCMV |
| ADV-03 | 干扰 | pDC316-ZsGreen-shRNA | 1010PFU/ml | ZsGreen | U6 |
| ADV-04 | 双干扰 | pDC316-H1-U6-shRNA2 | 1010PFU/ml | 无 | U6,H1 |
注射部位、注射剂量和观察时间
| 血清型 | 荧光 | 注射(观察)部位 | 病毒滴度 | 注射体积 | 检测时间 |
| ADV5 | EGFP | 小鼠尾静脉(肝脏) | 1E+10VG/mL | 100ul | 7-10天 |
| ADV5 | EGFP | 小鼠尾静脉(肺脏) | 1E+10VG/mL | 100ul | 7-10天 |
| ADV5 | EGFP | 大鼠脑立体定位(大脑皮层) | 1E+11 VG/mL | 1.0ul | 7天 |
以上为已经发表文章成功案例的推荐剂量。
![]() |
– | ![]() |


