443143416货号：A105-50
规格：50rxn
保存：-20℃避光保存两年
【产品概述】
RT SuperMix with dsDNase是将RNA逆转录成为cDNA更为简便的操作系统，含有第一链cDNA合成所需的所有试剂，只需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应。合成的第一链cDNA可广泛用于文库构建、第二链合成、杂交、PCR扩增、RT-qPCR检测等。试剂盒中包含新一代的逆转录酶和优化的缓冲液，与普通逆转录酶系统相比，具有逆转录能力强（合成较多全长cDNA）、无RNase H活性、热稳定性高和半衰期长等优点。该逆转录酶产物得率更高，获得的cDNA片段更长，模板使用范围更广等特点。5×Reaction Mix包含逆转录反应所需的缓冲液，dNTPs及优化的逆转录引物，Supreme Enzyme Mix包含Reverse Transcriptase，Ribonuclease Inhibitor和dsDNase，以简化加样步骤。试剂盒中含有的新型dsDNase，能够特异性去除双链DNA，而不消化RNA样品、逆转录引物及合成的cDNA，并且具有热敏感性，可在55℃快速不可逆失活，实现去除基因组污染与逆转录反应的同步进行。
【第一链cDNA合成】
- 在RNase-free离心管中配制如下混合液，轻轻混匀以下成分：
| Component | Volume |
| 10 pg-5 μg Total RNA or 10 pg-500 ng mRNA*1 | As Required |
| DEPC-treated Water | up to 13 μl |
| 5×Reaction Mix*2 | 4 μl |
| Supreme Enzyme Mix | 3 μl |
*1：为保证逆转录成功，请使用高质量RNA模板。
*2：5×Reaction Mix在使用前需充分混匀。
- 按照下表所示进行逆转录反应：
| Temperature | Time | Note |
| 25℃ | 10 min | 随机引物与RNA模板配对及去除基因组DNA |
| 55℃ | 15 min | 逆转录反应及dsDNase快速灭活 |
| 85℃ | 5 min | 逆转录酶灭活 |
- 产物可立即用于PCR或qPCR反应，或在-20℃保存，并在半年内使用；长期存放建议分装后在-70℃保存。cDNA应避免反复冻融。
【注意事项】
防止RNase污染：操作时需穿戴手套、口罩和工作服，实验用的耗材均需保证RNase-free。
【备注】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时，本公司承诺为客户免费更换等量的合格产品。 在所有情况下，本公司对此产品所承担的责任，仅限于此产品的价值本身。