pPIC9

pPIC9载体的详细信息如下：

• pPIC9载体大小8,023 bp，是融合表达载体。
• 载体构建过程中，可供使用的单一限制性内切酶位点为Xho I, SnaB I, EcoR I, Avr II, Not I.
• 利用alpha因子分泌信号肽，分泌表达蛋白基因。
• 在载体构建过程中，你的基因必须保证与信号肽的起始密码子的读码框一致。
• 毕赤酵母中利用HIS4进行筛选。
• 为了将基因插入GS115或KM71的AOX区, 使用SacI限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)
• 为了将基因插入GS115或KM71的His4区, 使用Sal I或者Stu I限制性内切酶线性化质粒(GS115中产生His+ Mut+基因型，KM71中产生His+ MutS基因型)
• 将基因插入GS115的AOX1区域，需要使用Bgl II线性化质粒 (产生His+MutS基因型)。

0001 AGATCTAACA TCCAAAGACG AAAGGTTGAA TGAAACCTTT TTGCCATCCG ACATCCACAG 
0061 GTCCATTCTC ACACATAAGT GCCAAACGCA ACAGGAGGGG ATACACTAGC AGCAGACCGT 
0121 TGCAAACGCA GGACCTCCAC TCCTCTTCTC CTCAACACCC ACTTTTGCCA TCGAAAAACC 
0181 AGCCCAGTTA TTGGGCTTGA TTGGAGCTCG CTCATTCCAA TTCCTTCTAT TAGGCTACTA 
0241 ACACCATGAC TTTATTAGCC TGTCTATCCT GGCCCCCCTG GCGAGGTTCA TGTTTGTTTA 
0301 TTTCCGAATG CAACAAGCTC CGCATTACAC CCGAACATCA CTCCAGATGA GGGCTTTCTG 
0361 AGTGTGGGGT CAAATAGTTT CATGTTCCCC AAATGGCCCA AAACTGACAG TTTAAACGCT 
0421 GTCTTGGAAC CTAATATGAC AAAAGCGTGA TCTCATCCAA GATGAACTAA GTTTGGTTCG 
0481 TTGAAATGCT AACGGCCAGT TGGTCAAAAA GAAACTTCCA AAAGTCGCCA TACCGTTTGT 
0541 CTTGTTTGGT ATTGATTGAC GAATGCTCAA AAATAATCTC ATTAATGCTT AGCGCAGTCT 
0601 CTCTATCGCT TCTGAACCCC GGTGCACCTG TGCCGAAACG CAAATGGGGA AACACCCGCT 
0661 TTTTGGATGA TTATGCATTG TCTCCACATT GTATGCTTCC AAGATTCTGG TGGGAATACT 
0721 GCTGATAGCC TAACGTTCAT GATCAAAATT TAACTGTTCT AACCCCTACT TGACAGCAAT 
0781 ATATAAACAG AAGGAAGCTG CCCTGTCTTA AACCTTTTTT TTTATCATCA TTATTAGCTT 
0841 ACTTTCATAA TTGCGACTGG TTCCAATTGA CAAGCTTTTG ATTTTAACGA CTTTTAACGA 
0901 CAACTTGAGA AGATCAAAAA ACAACTAATT ATTCGAAGGA TCCAAACGAT GAGATTTCCT 
0961 TCAATTTTTA CTGCAGTTTT ATTCGCAGCA TCCTCCGCAT TAGCTGCTCC AGTCAACACT 
1021 ACAACAGAAG ATGAAACGGC ACAAATTCCG GCTGAAGCTG TCATCGGTTA CTCAGATTTA 
1081 GAAGGGGATT TCGATGTTGC TGTTTTGCCA TTTTCCAACA GCACAAATAA CGGGTTATTG 
1141 TTTATAAATA CTACTATTGC CAGCATTGCT GCTAAAGAAG AAGGGGTATC TCTCGAGAAA 
1201 AGAGAGGCTG AAGCTTACGT AGAATTCCCT AGGGCGGCCG CGAATTAATT CGCCTTAGAC 
1261 ATGACTGTTC CTCAGTTCAA GTTGGGCACT TACGAGAAGA CCGGTCTTGC TAGATTCTAA 
1321 TCAAGAGGAT GTCAGAATGC CATTTGCCTG AGAGATGCAG GCTTCATTTT TGATACTTTT 
1381 TTATTTGTAA CCTATATAGT ATAGGATTTT TTTTGTCATT TTGTTTCTTC TCGTACGAGC 
1441 TTGCTCCTGA TCAGCCTATC TCGCAGCTGA TGAATATCTT GTGGTAGGGG TTTGGGAAAA 
1501 TCATTCGAGT TTGATGTTTT TCTTGGTATT TCCCACTCCT CTTCAGAGTA CAGAAGATTA 
1561 AGTGAGAAGT TCGTTTGTGC AAGCTTATCG ATAAGCTTTA ATGCGGTAGT TTATCACAGT 
1621 TAAATTGCTA ACGCAGTCAG GCACCGTGTA TGAAATCTAA CAATGCGCTC ATCGTCATCC 
1681 TCGGCACCGT CACCCTGGAT GCTGTAGGCA TAGGCTTGGT TATGCCGGTA CTGCCGGGCC 
1741 TCTTGCGGGA TATCGTCCAT TCCGACAGCA TCGCCAGTCA CTATGGCGTG CTGCTAGCGC 
1801 TATATGCGTT GATGCAATTT CTATGCGCAC CCGTTCTCGG AGCACTGTCC GACCGCTTTG 
1861 GCCGCCGCCC AGTCCTGCTC GCTTCGCTAC TTGGAGCCAC TATCGACTAC GCGATCATGG 
1921 CGACCACACC CGTCCTGTGG ATCTATCGAA TCTAAATGTA AGTTAAAATC TCTAAATAAT 
1981 TAAATAAGTC CCAGTTTCTC CATACGAACC TTAACAGCAT TGCGGTGAGC ATCTAGACCT 
2041 TCAACAGCAG CCAGATCCAT CACTGCTTGG CCAATATGTT TCAGTCCCTC AGGAGTTACG 
2101 TCTTGTGAAG TGATGAACTT CTGGAAGGTT GCAGTGTTAA CTCCGCTGTA TTGACGGGCA 
2161 TATCCGTACG TTGGCAAAGT GTGGTTGGTA CCGGAGGAGT AATCTCCACA ACTCTCTGGA 
2221 GAGTAGGCAC CAACAAACAC AGATCCAGCG TGTTGTACTT GATCAACATA AGAAGAAGCA 
2281 TTCTCGATTT GCAGGATCAA GTGTTCAGGA GCGTACTGAT TGGACATTTC CAAAGCCTGC 
2341 TCGTAGGTTG CAACCGATAG GGTTGTAGAG TGTGCAATAC ACTTGCGTAC AATTTCAACC 
2401 CTTGGCAACT GCACAGCTTG GTTGTGAACA GCATCTTCAA TTCTGGCAAG CTCCTTGTCT 
2461 GTCATATCGA CAGCCAACAG AATCACCTGG GAATCAATAC CATGTTCAGC TTGAGACAGA 
2521 AGGTCTGAGG CAACGAAATC TGGATCAGCG TATTTATCAG CAATAACTAG AACTTCAGAA 
2581 GGCCCAGCAG GCATGTCAAT ACTACACAGG GCTGATGTGT CATTTTGAAC CATCATCTTG 
2641 GCAGCAGTAA CGAACTGGTT TCCTGGACCA AATATTTTGT CACACTTAGG AACAGTTTCT 
2701 GTTCCGTAAG CCATAGCAGC TACTGCCTGG GCGCCTCCTG CTAGCACGAT ACACTTAGCA 
2761 CCAACCTTGT GGGCAACGTA GATGACTTCT GGGGTAAGGG TACCATCCTT CTTAGGTGGA 
2821 GATGCAAAAA CAATTTCTTT GCAACCAGCA ACTTTGGCAG GAACACCCAG CATCAGGGAA 
2881 GTGGAAGGCA GAATTGCGGT TCCACCAGGA ATATAGAGGC CAACTTTCTC AATAGGTCTT 
2941 GCAAAACGAG AGCAGACTAC ACCAGGGCAA GTCTCAACTT GCAACGTCTC CGTTAGTTGA 
3001 GCTTCATGGA ATTTCCTGAC GTTATCTATA GAGAGATCAA TGGCTCTCTT AACGTTATCT 
3061 GGCAATTGCA TAAGTTCCTC TGGGAAAGGA GCTTCTAACA CAGGTGTCTT CAAAGCGACT 
3121 CCATCAAACT TGGCAGTTAG TTCTAAAAGG GCTTTGTCAC CATTTTGACG AACATTGTCG 
3181 ACAATTGGTT TGACTAATTC CATAATCTGT TCCGTTTTCT GGATAGGACG ACGAAGGGCA 
3241 TCTTCAATTT CTTGTGAGGA GGCCTTAGAA ACGTCAATTT TGCACAATTC AATACGACCT 
3301 TCAGAAGGGA CTTCTTTAGG TTTGGATTCT TCTTTAGGTT GTTCCTTGGT GTATCCTGGC 
3361 TTGGCATCTC CTTTCCTTCT AGTGACCTTT AGGGACTTCA TATCCAGGTT TCTCTCCACC 
3421 TCGTCCAACG TCACACCGTA CTTGGCACAT CTAACTAATG CAAAATAAAA TAAGTCAGCA 
3481 CATTCCCAGG CTATATCTTC CTTGGATTTA GCTTCTGCAA GTTCATCAGC TTCCTCCCTA 
3541 ATTTTAGCGT TCAACAAAAC TTCGTCGTCA AATAACCGTT TGGTATAAGA ACCTTCTGGA 
3601 GCATTGCTCT TACGATCCCA CAAGGTGGCT TCCATGGCTC TAAGACCCTT TGATTGGCCA 
3661 AAACAGGAAG TGCGTTCCAA GTGACAGAAA CCAACACCTG TTTGTTCAAC CACAAATTTC 
3721 AAGCAGTCTC CATCACAATC CAATTCGATA CCCAGCAACT TTTGAGTTGC TCCAGATGTA 
3781 GCACCTTTAT ACCACAAACC GTGACGACGA GATTGGTAGA CTCCAGTTTG TGTCCTTATA 
3841 GCCTCCGGAA TAGACTTTTT GGACGAGTAC ACCAGGCCCA ACGAGTAATT AGAAGAGTCA 
3901 GCCACCAAAG TAGTGAATAG ACCATCGGGG CGGTCAGTAG TCAAAGACGC CAACAAAATT 
3961 TCACTGACAG GGAACTTTTT GACATCTTCA GAAAGTTCGT ATTCAGTAGT CAATTGCCGA 
4021 GCATCAATAA TGGGGATTAT ACCAGAAGCA ACAGTGGAAG TCACATCTAC CAACTTTGCG 
4081 GTCTCAGAAA AAGCATAAAC AGTTCTACTA CCGCCATTAG TGAAACTTTT CAAATCGCCC 
4141 AGTGGAGAAG AAAAAGGCAC AGCGATACTA GCATTAGCGG GCAAGGATGC AACTTTATCA 
4201 ACCAGGGTCC TATAGATAAC CCTAGCGCCT GGGATCATCC TTTGGACAAC TCTTTCTGCC 
4261 AAATCTAGGT CCAAAATCAC TTCATTGATA CCATTATTGT ACAACTTGAG CAAGTTGTCG 
4321 ATCAGCTCCT CAAATTGGTC CTCTGTAACG GATGACTCAA CTTGCACATT AACTTGAAGC 
4381 TCAGTCGATT GAGTGAACTT GATCAGGTTG TGCAGCTGGT CAGCAGCATA GGGAAACACG 
4441 GCTTTTCCTA CCAAACTCAA GGAATTATCA AACTCTGCAA CACTTGCGTA TGCAGGTAGC 
4501 AAGGGAAATG TCATACTTGA AGTCGGACAG TGAGTGTAGT CTTGAGAAAT TCTGAAGCCG 
4561 TATTTTTATT ATCAGTGAGT CAGTCATCAG GAGATCCTCT ACGCCGGACG CATCGTGGCC 
4621 GGCATCACCG GCGCCACAGG TGCGGTTGCT GGCGCCTATA TCGCCGACAT CACCGATGGG 
4681 GAAGATCGGG CTCGCCACTT CGGGCTCATG AGCGCTTGTT TCGGCGTGGG TATGGTGGCA 
4741 GGCCCCGTGG CCGGGGGACT GTTGGGCGCC ATCTCCTTGC ATGCACCATT CCTTGCGGCG 
4801 GCGGTGCTCA ACGGCCTCAA CCTACTACTG GGCTGCTTCC TAATGCAGGA GTCGCATAAG 
4861 GGAGAGCGTC GAGTATCTAT GATTGGAAGT ATGGGAATGG TGATACCCGC ATTCTTCAGT 
4921 GTCTTGAGGT CTCCTATCAG ATTATGCCCA ACTAAAGCAA CCGGAGGAGG AGATTTCATG 
4981 GTAAATTTCT CTGACTTTTG GTCATCAGTA GACTCGAACT GTGAGACTAT CTCGGTTATG 
5041 ACAGCAGAAA TGTCCTTCTT GGAGACAGTA AATGAAGTCC CACCAATAAA GAAATCCTTG 
5101 TTATCAGGAA CAAACTTCTT GTTTCGAACT TTTTCGGTGC CTTGAACTAT AAAATGTAGA 
5161 GTGGATATGT CGGGTAGGAA TGGAGCGGGC AAATGCTTAC CTTCTGGACC TTCAAGAGGT 
5221 ATGTAGGGTT TGTAGATACT GATGCCAACT TCAGTGACAA CGTTGCTATT TCGTTCAAAC 
5281 CATTCCGAAT CCAGAGAAAT CAAAGTTGTT TGTCTACTAT TGATCCAAGC CAGTGCGGTC 
5341 TTGAAACTGA CAATAGTGTG CTCGTGTTTT GAGGTCATCT TTGTATGAAT AAATCTAGTC 
5401 TTTGATCTAA ATAATCTTGA CGAGCCAAGG CGATAAATAC CCAAATCTAA AACTCTTTTA 
5461 AAACGTTAAA AGGACAAGTA TGTCTGCCTG TATTAAACCC CAAATCAGCT CGTAGTCTGA 
5521 TCCTCATCAA CTTGAGGGGC ACTATCTTGT TTTAGAGAAA TTTGCGGAGA TGCGATATCG 
5581 AGAAAAAGGT ACGCTGATTT TAAACGTGAA ATTTATCTCA AGATCTCTGC CTCGCGCGTT 
5641 TCGGTGATGA CGGTGAAAAC CTCTGACACA TGCAGCTCCC GGAGACGGTC ACAGCTTGTC 
5701 TGTAAGCGGA TGCCGGGAGC AGACAAGCCC GTCAGGGCGC GTCAGCGGGT GTTGGCGGGT 
5761 GTCGGGGCGC AGCCATGACC CAGTCACGTA GCGATAGCGG AGTGTATACT GGCTTAACTA 
5821 TGCGGCATCA GAGCAGATTG TACTGAGAGT GCACCATATG CGGTGTGAAA TACCGCACAG 
5881 ATGCGTAAGG AGAAAATACC GCATCAGGCG CTCTTCCGCT TCCTCGCTCA CTGACTCGCT 
5941 GCGCTCGGTC GTTCGGCTGC GGCGAGCGGT ATCAGCTCAC TCAAAGGCGG TAATACGGTT 
6001 ATCCACAGAA TCAGGGGATA ACGCAGGAAA GAACATGTGA GCAAAAGGCC AGCAAAAGGC 
6061 CAGGAACCGT AAAAAGGCCG CGTTGCTGGC GTTTTTCCAT AGGCTCCGCC CCCCTGACGA 
6121 GCATCACAAA AATCGACGCT CAAGTCAGAG GTGGCGAAAC CCGACAGGAC TATAAAGATA 
6181 CCAGGCGTTT CCCCCTGGAA GCTCCCTCGT GCGCTCTCCT GTTCCGACCC TGCCGCTTAC 
6241 CGGATACCTG TCCGCCTTTC TCCCTTCGGG AAGCGTGGCG CTTTCTCAAT GCTCACGCTG 
6301 TAGGTATCTC AGTTCGGTGT AGGTCGTTCG CTCCAAGCTG GGCTGTGTGC ACGAACCCCC 
6361 CGTTCAGCCC GACCGCTGCG CCTTATCCGG TAACTATCGT CTTGAGTCCA ACCCGGTAAG 
6421 ACACGACTTA TCGCCACTGG CAGCAGCCAC TGGTAACAGG ATTAGCAGAG CGAGGTATGT 
6481 AGGCGGTGCT ACAGAGTTCT TGAAGTGGTG GCCTAACTAC GGCTACACTA GAAGGACAGT 
6541 ATTTGGTATC TGCGCTCTGC TGAAGCCAGT TACCTTCGGA AAAAGAGTTG GTAGCTCTTG 
6601 ATCCGGCAAA CAAACCACCG CTGGTAGCGG TGGTTTTTTT GTTTGCAAGC AGCAGATTAC 
6661 GCGCAGAAAA AAAGGATCTC AAGAAGATCC TTTGATCTTT TCTACGGGGT CTGACGCTCA 
6721 GTGGAACGAA AACTCACGTT AAGGGATTTT GGTCATGAGA TTATCAAAAA GGATCTTCAC 
6781 CTAGATCCTT TTAAATTAAA AATGAAGTTT TAAATCAATC TAAAGTATAT ATGAGTAAAC 
6841 TTGGTCTGAC AGTTACCAAT GCTTAATCAG TGAGGCACCT ATCTCAGCGA TCTGTCTATT 
6901 TCGTTCATCC ATAGTTGCCT GACTCCCCGT CGTGTAGATA ACTACGATAC GGGAGGGCTT 
6961 ACCATCTGGC CCCAGTGCTG CAATGATACC GCGAGACCCA CGCTCACCGG CTCCAGATTT 
7021 ATCAGCAATA AACCAGCCAG CCGGAAGGGC CGAGCGCAGA AGTGGTCCTG CAACTTTATC 
7081 CGCCTCCATC CAGTCTATTA ATTGTTGCCG GGAAGCTAGA GTAAGTAGTT CGCCAGTTAA 
7141 TAGTTTGCGC AACGTTGTTG CCATTGCTGC AGGCATCGTG GTGTCACGCT CGTCGTTTGG 
7201 TATGGCTTCA TTCAGCTCCG GTTCCCAACG ATCAAGGCGA GTTACATGAT CCCCCATGTT 
7261 GTGCAAAAAA GCGGTTAGCT CCTTCGGTCC TCCGATCGTT GTCAGAAGTA AGTTGGCCGC 
7321 AGTGTTATCA CTCATGGTTA TGGCAGCACT GCATAATTCT CTTACTGTCA TGCCATCCGT 
7381 AAGATGCTTT TCTGTGACTG GTGAGTACTC AACCAAGTCA TTCTGAGAAT AGTGTATGCG 
7441 GCGACCGAGT TGCTCTTGCC CGGCGTCAAC ACGGGATAAT ACCGCGCCAC ATAGCAGAAC 
7501 TTTAAAAGTG CTCATCATTG GAAAACGTTC TTCGGGGCGA AAACTCTCAA GGATCTTACC 
7561 GCTGTTGAGA TCCAGTTCGA TGTAACCCAC TCGTGCACCC AACTGATCTT CAGCATCTTT 
7621 TACTTTCACC AGCGTTTCTG GGTGAGCAAA AACAGGAAGG CAAAATGCCG CAAAAAAGGG 
7681 AATAAGGGCG ACACGGAAAT GTTGAATACT CATACTCTTC CTTTTTCAAT ATTATTGAAG 
7741 CATTTATCAG GGTTATTGTC TCATGAGCGG ATACATATTT GAATGTATTT AGAAAAATAA 
7801 ACAAATAGGG GTTCCGCGCA CATTTCCCCG AAAAGTGCCA CCTGACGTCT AAGAAACCAT 
7861 TATTATCATG ACATTAACCT ATAAAAATAG GCGTATCACG AGGCCCTTTC GTCTTCAAGA 
7921 ATTAATTCTC ATGTTTGACA GCTTATCATC GATAAGCTGA CTCATGTTGG TATTGTGAAA 
7981 TAGACGCAGA TCGGGAACAC TGAAAAATAA CAGTTATTAT TCG