pPICZα A

pPICZα A，B和C是3.6 kb的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白，含有一个N-端多肽，编码酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）α-因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白，并且可以用在任何毕赤酵母中，包括X33，GS115菌株，SMD1168H，KM71H。

pPICZα? A，B和C系列载体包含以下元素：

• 5'端含有AOX1启动子的严格调控，利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因（Ellis等，1985; Koutz等人，1989;tschopp等人，1987A）。
• α-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。 ?Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选（Baron等人,1992; Drocourt等人，1990）。
• C-端含Myc和His标签，可以用于检测和纯化重组蛋白。
• pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。

0001 AGATCTAACA TCCAAAGACG AAAGGTTGAA TGAAACCTTT TTGCCATCCG ACATCCACAG 
0061 GTCCATTCTC ACACATAAGT GCCAAACGCA ACAGGAGGGG ATACACTAGC AGCAGACCGT 
0121 TGCAAACGCA GGACCTCCAC TCCTCTTCTC CTCAACACCC ACTTTTGCCA TCGAAAAACC 
0181 AGCCCAGTTA TTGGGCTTGA TTGGAGCTCG CTCATTCCAA TTCCTTCTAT TAGGCTACTA 
0241 ACACCATGAC TTTATTAGCC TGTCTATCCT GGCCCCCCTG GCGAGGTTCA TGTTTGTTTA 
0301 TTTCCGAATG CAACAAGCTC CGCATTACAC CCGAACATCA CTCCAGATGA GGGCTTTCTG 
0361 AGTGTGGGGT CAAATAGTTT CATGTTCCCC AAATGGCCCA AAACTGACAG TTTAAACGCT 
0421 GTCTTGGAAC CTAATATGAC AAAAGCGTGA TCTCATCCAA GATGAACTAA GTTTGGTTCG 
0481 TTGAAATGCT AACGGCCAGT TGGTCAAAAA GAAACTTCCA AAAGTCGGCA TACCGTTTGT 
0541 CTTGTTTGGT ATTGATTGAC GAATGCTCAA AAATAATCTC ATTAATGCTT AGCGCAGTCT 
0601 CTCTATCGCT TCTGAACCCC GGTGCACCTG TGCCGAAACG CAAATGGGGA AACACCCGCT 
0661 TTTTGGATGA TTATGCATTG TCTCCACATT GTATGCTTCC AAGATTCTGG TGGGAATACT 
0721 GCTGATAGCC TAACGTTCAT GATCAAAATT TAACTGTTCT AACCCCTACT TGACAGCAAT 
0781 ATATAAACAG AAGGAAGCTG CCCTGTCTTA AACCTTTTTT TTTATCATCA TTATTAGCTT 
0841 ACTTTCATAA TTGCGACTGG TTCCAATTGA CAAGCTTTTG ATTTTAACGA CTTTTAACGA 
0901 CAACTTGAGA AGATCAAAAA ACAACTAATT ATTCGAAACG ATGAGATTTC CTTCAATTTT 
0961 TACTGCTGTT TTATTCGCAG CATCCTCCGC ATTAGCTGCT CCAGTCAACA CTACAACAGA 
1021 AGATGAAACG GCACAAATTC CGGCTGAAGC TGTCATCGGT TACTCAGATT TAGAAGGGGA 
1081 TTTCGATGTT GCTGTTTTGC CATTTTCCAA CAGCACAAAT AACGGGTTAT TGTTTATAAA 
1141 TACTACTATT GCCAGCATTG CTGCTAAAGA AGAAGGGGTA TCTCTCGAGA AAAGAGAGGC 
1201 TGAAGCTGAA TTCACGTGGC CCAGCCGGCC GTCTCGGATC GGTACCTCGA GCCGCGGCGG 
1261 CCGCCAGCTT TCTAGAACAA AAACTCATCT CAGAAGAGGA TCTGAATAGC GCCGTCGACC 
1321 ATCATCATCA TCATCATTGA GTTTGTAGCC TTAGACATGA CTGTTCCTCA GTTCAAGTTG 
1381 GGCACTTACG AGAAGACCGG TCTTGCTAGA TTCTAATCAA GAGGATGTCA GAATGCCATT 
1441 TGCCTGAGAG ATGCAGGCTT CATTTTTGAT ACTTTTTTAT TTGTAACCTA TATAGTATAG 
1501 GATTTTTTTT GTCATTTTGT TTCTTCTCGT ACGAGCTTGC TCCTGATCAG CCTATCTCGC 
1561 AGCTGATGAA TATCTTGTGG TAGGGGTTTG GGAAAATCAT TCGAGTTTGA TGTTTTTCTT 
1621 GGTATTTCCC ACTCCTCTTC AGAGTACAGA AGATTAAGTG AGACCTTCGT TTGTGCGGAT 
1681 CCCCCACACA CCATAGCTTC AAAATGTTTC TACTCCTTTT TTACTCTTCC AGATTTTCTC 
1741 GGACTCCGCG CATCGCCGTA CCACTTCAAA ACACCCAAGC ACAGCATACT AAATTTTCCC 
1801 TCTTTCTTCC TCTAGGGTGT CGTTAATTAC CCGTACTAAA GGTTTGGAAA AGAAAAAAGA 
1861 GACCGCCTCG TTTCTTTTTC TTCGTCGAAA AAGGCAATAA AAATTTTTAT CACGTTTCTT 
1921 TTTCTTGAAA TTTTTTTTTT TAGTTTTTTT CTCTTTCAGT GACCTCCATT GATATTTAAG 
1981 TTAATAAACG GTCTTCAATT TCTCAAGTTT CAGTTTCATT TTTCTTGTTC TATTACAACT 
2041 TTTTTTACTT CTTGTTCATT AGAAAGAAAG CATAGCAATC TAATCTAAGG GGCGGTGTTG 
2101 ACAATTAATC ATCGGCATAG TATATCGGCA TAGTATAATA CGACAAGGTG AGGAACTAAA 
2161 CCATGGCCAA GTTGACCAGT GCCGTTCCGG TGCTCACCGC GCGCGACGTC GCCGGAGCGG 
2221 TCGAGTTCTG GACCGACCGG CTCGGGTTCT CCCGGGACTT CGTGGAGGAC GACTTCGCCG 
2281 GTGTGGTCCG GGACGACGTG ACCCTGTTCA TCAGCGCGGT CCAGGACCAG GTGGTGCCGG 
2341 ACAACACCCT GGCCTGGGTG TGGGTGCGCG GCCTGGACGA GCTGTACGCC GAGTGGTCGG 
2401 AGGTCGTGTC CACGAACTTC CGGGACGCCT CCGGGCCGGC CATGACCGAG ATCGGCGAGC 
2461 AGCCGTGGGG GCGGGAGTTC GCCCTGCGCG ACCCGGCCGG CAACTGCGTG CACTTCGTGG 
2521 CCGAGGAGCA GGACTGACAC GTCCGACGGC GGCCCACGGG TCCCAGGCCT CGGAGATCCG 
2581 TCCCCCTTTT CCTTTGTCGA TATCATGTAA TTAGTTATGT CACGCTTACA TTCACGCCCT 
2641 CCCCCCACAT CCGCTCTAAC CGAAAAGGAA GGAGTTAGAC AACCTGAAGT CTAGGTCCCT 
2701 ATTTATTTTT TTATAGTTAT GTTAGTATTA AGAACGTTAT TTATATTTCA AATTTTTCTT 
2761 TTTTTTCTGT ACAGACGCGT GTACGCATGT AACATTATAC TGAAAACCTT GCTTGAGAAG 
2821 GTTTTGGGAC GCTCGAAGGC TTTAATTTGC AAGCTGGAGA CCAACATGTG AGCAAAAGGC 
2881 CAGCAAAAGG CCAGGAACCG TAAAAAGGCC GCGTTGCTGG CGTTTTTCCA TAGGCTCCGC 
2941 CCCCCTGACG AGCATCACAA AAATCGACGC TCAAGTCAGA GGTGGCGAAA CCCGACAGGA 
3001 CTATAAAGAT ACCAGGCGTT TCCCCCTGGA AGCTCCCTCG TGCGCTCTCC TGTTCCGACC 
3061 CTGCCGCTTA CCGGATACCT GTCCGCCTTT CTCCCTTCGG GAAGCGTGGC GCTTTCTCAA 
3121 TGCTCACGCT GTAGGTATCT CAGTTCGGTG TAGGTCGTTC GCTCCAAGCT GGGCTGTGTG 
3181 CACGAACCCC CCGTTCAGCC CGACCGCTGC GCCTTATCCG GTAACTATCG TCTTGAGTCC 
3241 AACCCGGTAA GACACGACTT ATCGCCACTG GCAGCAGCCA CTGGTAACAG GATTAGCAGA 
3301 GCGAGGTATG TAGGCGGTGC TACAGAGTTC TTGAAGTGGT GGCCTAACTA CGGCTACACT 
3361 AGAAGGACAG TATTTGGTAT CTGCGCTCTG CTGAAGCCAG TTACCTTCGG AAAAAGAGTT 
3421 GGTAGCTCTT GATCCGGCAA ACAAACCACC GCTGGTAGCG GTGGTTTTTT TGTTTGCAAG 
3481 CAGCAGATTA CGCGCAGAAA AAAAGGATCT CAAGAAGATC CTTTGATCTT TTCTACGGGG 
3541 TCTGACGCTC AGTGGAACGA AAACTCACGT TAAGGGATTT TGGTCATGAG ATC