pPICZα B

pPICZα A，B和C是3.6 kb的毕赤酵母蛋白分泌表达载体。表达的重组蛋白是融合蛋白，含有一个N-端多肽，编码酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）α-因子分泌信号。载体能够在毕赤酵母中利用甲醇诱导的高水 平的表达目的蛋白，并且可以用在任何毕赤酵母中，包括X33，GS115菌株，SMD1168H，KM71H。

pPICZα? A，B和C系列载体包含以下元素：

• 5'端含有AOX1启动子的严格调控，利用甲醇诱导表达任何感兴趣的基因（Ellis等，1985; Koutz等人，1989;tschopp等人，1987A）。
• α-因子分泌信号能够分泌性表达目的蛋白。 ?Zeocin抗性基因在大肠杆菌和毕赤酵母都能用于筛选（Baron等人,1992; Drocourt等人，1990）。
• C-端含Myc和His标签，可以用于检测和纯化重组蛋白。
• pPICZ A, B, C三种读码框使得可以将基因克隆入载体而不发生任何移码突变。

0001 AGATCTAACA TCCAAAGACG AAAGGTTGAA TGAAACCTTT TTGCCATCCG ACATCCACAG 
0061 GTCCATTCTC ACACATAAGT GCCAAACGCA ACAGGAGGGG ATACACTAGC AGCAGACCGT 
0121 TGCAAACGCA GGACCTCCAC TCCTCTTCTC CTCAACACCC ACTTTTGCCA TCGAAAAACC 
0181 AGCCCAGTTA TTGGGCTTGA TTGGAGCTCG CTCATTCCAA TTCCTTCTAT TAGGCTACTA 
0241 ACACCATGAC TTTATTAGCC TGTCTATCCT GGCCCCCCTG GCGAGGTTCA TGTTTGTTTA 
0301 TTTCCGAATG CAACAAGCTC CGCATTACAC CCGAACATCA CTCCAGATGA GGGCTTTCTG 
0361 AGTGTGGGGT CAAATAGTTT CATGTTCCCC AAATGGCCCA AAACTGACAG TTTAAACGCT 
0421 GTCTTGGAAC CTAATATGAC AAAAGCGTGA TCTCATCCAA GATGAACTAA GTTTGGTTCG 
0481 TTGAAATGCT AACGGCCAGT TGGTCAAAAA GAAACTTCCA AAAGTCGGCA TACCGTTTGT 
0541 CTTGTTTGGT ATTGATTGAC GAATGCTCAA AAATAATCTC ATTAATGCTT AGCGCAGTCT 
0601 CTCTATCGCT TCTGAACCCC GGTGCACCTG TGCCGAAACG CAAATGGGGA AACACCCGCT 
0661 TTTTGGATGA TTATGCATTG TCTCCACATT GTATGCTTCC AAGATTCTGG TGGGAATACT 
0721 GCTGATAGCC TAACGTTCAT GATCAAAATT TAACTGTTCT AACCCCTACT TGACAGCAAT 
0781 ATATAAACAG AAGGAAGCTG CCCTGTCTTA AACCTTTTTT TTTATCATCA TTATTAGCTT 
0841 ACTTTCATAA TTGCGACTGG TTCCAATTGA CAAGCTTTTG ATTTTAACGA CTTTTAACGA 
0901 CAACTTGAGA AGATCAAAAA ACAACTAATT ATTCGAAACG ATGAGATTTC CTTCAATTTT 
0961 TACTGCTGTT TTATTCGCAG CATCCTCCGC ATTAGCTGCT CCAGTCAACA CTACAACAGA 
1021 AGATGAAACG GCACAAATTC CGGCTGAAGC TGTCATCGGT TACTCAGATT TAGAAGGGGA 
1081 TTTCGATGTT GCTGTTTTGC CATTTTCCAA CAGCACAAAT AACGGGTTAT TGTTTATAAA 
1141 TACTACTATT GCCAGCATTG CTGCTAAAGA AGAAGGGGTA TCTCTCGAGA AAAGAGAGGC 
1201 TGAAGCTGCA GGAATTCACG TGGCCCAGCC GGCCGTCTCG GATCGGTACC TCGAGCCGCG 
1261 GCGGCCGCCA GCTTTCTAGA ACAAAAACTC ATCTCAGAAG AGGATCTGAA TAGCGCCGTC 
1321 GACCATCATC ATCATCATCA TTGAGTTTGT AGCCTTAGAC ATGACTGTTC CTCAGTTCAA 
1381 GTTGGGCACT TACGAGAAGA CCGGTCTTGC TAGATTCTAA TCAAGAGGAT GTCAGAATGC 
1441 CATTTGCCTG AGAGATGCAG GCTTCATTTT TGATACTTTT TTATTTGTAA CCTATATAGT 
1501 ATAGGATTTT TTTTGTCATT TTGTTTCTTC TCGTACGAGC TTGCTCCTGA TCAGCCTATC 
1561 TCGCAGCTGA TGAATATCTT GTGGTAGGGG TTTGGGAAAA TCATTCGAGT TTGATGTTTT 
1621 TCTTGGTATT TCCCACTCCT CTTCAGAGTA CAGAAGATTA AGTGAGACCT TCGTTTGTGC 
1681 GGATCCCCCA CACACCATAG CTTCAAAATG TTTCTACTCC TTTTTTACTC TTCCAGATTT 
1741 TCTCGGACTC CGCGCATCGC CGTACCACTT CAAAACACCC AAGCACAGCA TACTAAATTT 
1801 TCCCTCTTTC TTCCTCTAGG GTGTCGTTAA TTACCCGTAC TAAAGGTTTG GAAAAGAAAA 
1861 AAGAGACCGC CTCGTTTCTT TTTCTTCGTC GAAAAAGGCA ATAAAAATTT TTATCACGTT 
1921 TCTTTTTCTT GAAATTTTTT TTTTTAGTTT TTTTCTCTTT CAGTGACCTC CATTGATATT 
1981 TAAGTTAATA AACGGTCTTC AATTTCTCAA GTTTCAGTTT CATTTTTCTT GTTCTATTAC 
2041 AACTTTTTTT ACTTCTTGTT CATTAGAAAG AAAGCATAGC AATCTAATCT AAGGGGCGGT 
2101 GTTGACAATT AATCATCGGC ATAGTATATC GGCATAGTAT AATACGACAA GGTGAGGAAC 
2161 TAAACCATGG CCAAGTTGAC CAGTGCCGTT CCGGTGCTCA CCGCGCGCGA CGTCGCCGGA 
2221 GCGGTCGAGT TCTGGACCGA CCGGCTCGGG TTCTCCCGGG ACTTCGTGGA GGACGACTTC 
2281 GCCGGTGTGG TCCGGGACGA CGTGACCCTG TTCATCAGCG CGGTCCAGGA CCAGGTGGTG 
2341 CCGGACAACA CCCTGGCCTG GGTGTGGGTG CGCGGCCTGG ACGAGCTGTA CGCCGAGTGG 
2401 TCGGAGGTCG TGTCCACGAA CTTCCGGGAC GCCTCCGGGC CGGCCATGAC CGAGATCGGC 
2461 GAGCAGCCGT GGGGGCGGGA GTTCGCCCTG CGCGACCCGG CCGGCAACTG CGTGCACTTC 
2521 GTGGCCGAGG AGCAGGACTG ACACGTCCGA CGGCGGCCCA CGGGTCCCAG GCCTCGGAGA 
2581 TCCGTCCCCC TTTTCCTTTG TCGATATCAT GTAATTAGTT ATGTCACGCT TACATTCACG 
2641 CCCTCCCCCC ACATCCGCTC TAACCGAAAA GGAAGGAGTT AGACAACCTG AAGTCTAGGT 
2701 CCCTATTTAT TTTTTTATAG TTATGTTAGT ATTAAGAACG TTATTTATAT TTCAAATTTT 
2761 TCTTTTTTTT CTGTACAGAC GCGTGTACGC ATGTAACATT ATACTGAAAA CCTTGCTTGA 
2821 GAAGGTTTTG GGACGCTCGA AGGCTTTAAT TTGCAAGCTG GAGACCAACA TGTGAGCAAA 
2881 AGGCCAGCAA AAGGCCAGGA ACCGTAAAAA GGCCGCGTTG CTGGCGTTTT TCCATAGGCT 
2941 CCGCCCCCCT GACGAGCATC ACAAAAATCG ACGCTCAAGT CAGAGGTGGC GAAACCCGAC 
3001 AGGACTATAA AGATACCAGG CGTTTCCCCC TGGAAGCTCC CTCGTGCGCT CTCCTGTTCC 
3061 GACCCTGCCG CTTACCGGAT ACCTGTCCGC CTTTCTCCCT TCGGGAAGCG TGGCGCTTTC 
3121 TCAATGCTCA CGCTGTAGGT ATCTCAGTTC GGTGTAGGTC GTTCGCTCCA AGCTGGGCTG 
3181 TGTGCACGAA CCCCCCGTTC AGCCCGACCG CTGCGCCTTA TCCGGTAACT ATCGTCTTGA 
3241 GTCCAACCCG GTAAGACACG ACTTATCGCC ACTGGCAGCA GCCACTGGTA ACAGGATTAG 
3301 CAGAGCGAGG TATGTAGGCG GTGCTACAGA GTTCTTGAAG TGGTGGCCTA ACTACGGCTA 
3361 CACTAGAAGG ACAGTATTTG GTATCTGCGC TCTGCTGAAG CCAGTTACCT TCGGAAAAAG 
3421 AGTTGGTAGC TCTTGATCCG GCAAACAAAC CACCGCTGGT AGCGGTGGTT TTTTTGTTTG 
3481 CAAGCAGCAG ATTACGCGCA GAAAAAAAGG ATCTCAAGAA GATCCTTTGA TCTTTTCTAC 
3541 GGGGTCTGAC GCTCAGTGGA ACGAAAACTC ACGTTAAGGG ATTTTGGTCA TGAGATC