p3xFlag-CMV-14表达载体是一个6.3 kb的载体，从pCMV5载体衍生而来，用于在哺乳动物细胞内瞬表达或稳表达C末端带有3xFlag标签的融合蛋白。载体多克隆位点下游片段编码了三个相邻Flag抗原表位（Asp-Tyr-Lys-Xaa-Xaa-Asp）。这使得能够使用Flag M2抗体检测蛋白表达情况。
载体上的人类巨细胞病毒(cytomegalovirus)启动子调控区域促进了Flag融合蛋白基因的转录.氨基糖苷类磷酸转移酶基因(Neo)使得载体具有耐氨基糖苷类例如为G418的能力,允许筛选转染成功的细胞株。
pP3XFLAG-CMV-14表达载体是大肠杆菌和哺乳动物细胞的穿梭载体。当使用SV40 T抗原表达的宿主细胞系，如COS细胞，复制和基因组整合效率能够达到最佳最佳状态。