443143416服务价格及周期：
| 服务编号 | 服务内容 | 价格 | 服务周期 |
| MRNA-1 | 靶基因3′-UTR双荧光素酶野生型载体（‹1.5kb） | 1500元 | 1-2周 |
| MRNA-2 | 靶基因3′-UTR双荧光素酶突变型载体(一个位点) | 900元 | 1-2周 |
| MRNA-3 | 质粒提取（两个靶基因加一个对照质粒） | 900元 | 1-2周 |
| MRNA-4 | miRNA表达载体或mimic与双荧光素酶载体共转染(96孔板），双荧光素酶检测 | 5000元 | 1-2周 |
microRNA靶基因验证实验概述
当前，microRNA对靶基因的功能研究十分热门。利用荧光素酶报告基因检测实验寻找或验证microRNA对靶点作用性是不可或缺的实验技术。本公司可为您提供microRNA报告基因载体构建服务，并可进一步为您提供荧光素酶报告基因检测实验服务。您只需要提供目的microRNA靶位点序列，我们专业的技术服务人员就可替您完成载体构建，为您节省大量的时间和精力。
下图为microRNA-reporter载体表达框架示意图，具有多克隆位点，方便插入目的靶点序列。psiCHECK-2载体用于终点法的细胞裂解物检测，包含萤火虫荧光素酶基因，使海肾荧光素酶的表达水平归一化，令该系统更可靠、重现性更好。使用psiCHECK-2载体时，由于是一个载体，无须通过共转染进行归一化。
microRNA报告基因实验流程：
1.microRNA靶点的预测
利用Targetscan,miRanda,PicTar软件得到目的microRNA的预测靶点序列。
2.获得microRNA靶点序列
根据提供的靶序列，合成两条互补的单链DNA模板。或者，设计引物PCR扩增目的microRNA靶基因3’UTR序列，或直接合成。
3.microRNA靶序列克隆
将合成的两条单链退火成双链（具有粘性末端），或将PCR产物双酶切，后连入经过同样双酶切的miR-reporter载体中，连接产物转化大肠杆菌DH5α。
4.阳性克隆鉴定
挑选转化的菌落，PCR筛选含有插入片段的阳性克隆，测序验证克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
5.细胞转染准备
将含目的microRNA靶基因的报告基因载体、内参质粒和microRNA mimics或microRNA negative control共转染293T或Hela细胞。
6.荧光素酶检测
共转染细胞24-72h后，进行双荧光素酶检测，确定目的microRNA的靶基因。
整理分析数据，得出结论：
提供有microRNA靶序列的报告质粒，以及内参和对照质粒各一份。
甘油保存菌株各一支。
附mir-reporter载体的说明书
以及实验报告：
包括载体构建过程，鉴定记录，测序报告，细胞转染，荧光检测。